四川羊肚菌菌种生产基(jī)地浅(qiǎn)谈羊肚菌菌种的(de)培育(yù)方(fāng)法(fǎ)
发(fā)布日期:2019-05-06
本技术公(gōng)开了一种中药材(cái)的优质高(gāo)产种植(zhí)方法(fǎ)。该方法(fǎ)包括以下步(bù)骤:(1)母种的制(zhì)作及培养,包括①制作(zuò)母种培养(yǎng)基:将250g土豆、30g琼脂、25g葡萄糖和3g维(wéi)生(shēng)素B放(fàng)入(rù)2000ml的水中加热,直至琼脂完全煮化(huà)即得母种培养(yǎng)基(jī),②培育母种:将试管放入密封的无菌接种(zhǒng)箱中,每个试管中(zhōng)接(jiē)入1cm×1cm的菌丝后,置于20℃培养箱(xiāng)中,直至生长(zhǎng)成母种;(2)原种的制作及培(péi)养(yǎng),包括①制作原种培养基:取小麦80%、木销10%和麦麸10%,将所(suǒ)述小麦煮熟后(hòu)捞出,与所述木销(xiāo)和麦麸搅拌均匀,水(shuǐ)分控制(zhì)在60-80%,100℃下(xià)保(bǎo)温(wēn)6小(xiǎo)时,②培育原(yuán)种;(3)栽培中(zhōng)的制作及培养,包(bāo)括①制作栽培种培养基和②培育栽培(péi)种。本技术中(zhōng),培育出优良的羊肚菌菌种,提高了种(zhǒng)植的存活(huó)率。
具体实施方式
一(yī)种羊肚(dù)菌菌种的培(péi)育(yù)方法,该方法包括以下步骤:
(1)母(mǔ)种(zhǒng)的(de)制作及培养
①制作母种培(péi)养基:将250g土(tǔ)豆,30g琼脂,25g葡萄糖和(hé)3g维生(shēng)素(sù)B放入(rù)2000m1
的水中(zhōng)加热,直至(zhì)琼脂完全煮化即(jí)得母种培养基;
②培育母种:取所述母种(zhǒng)培养基 200ml装入300ml的试管(guǎn)中,用(yòng)棉(mián)花(huā)塞住管(guǎn)口(kǒu),将(jiāng)所述试(shì)管放在125℃的高压灭菌锅内灭菌(jun1)1. 5h冷却至室温(wēn)后,将所述试管放(fàng)入密封的无菌接种箱中,每个试管中(zhōng)接入1cmX 1cm的(de)菌丝后,置于(yú)20℃培养箱中,直至生长成母种。
在步骤(1)中,土豆需要预先(xiān)放(fàng)入水中煮(zhǔ)半(bàn)小时,之后将其捞山,再(zài)与琼脂、葡萄糖、维(wéi)生素(sù)B一起放(fàng)入水中煮,直(zhí)至琼(qióng)脂(zhī)煮化,将煮(zhǔ)好(hǎo)的培养基放在试管里,等凝固之后(hòu),再用(yòng)棉花寒住试管的管口。进(jìn)行母种的培育时,在(zài)将试管(guǎn)放入接种箱之前,还需(xū)要用75%的(de)酒(jiǔ)精(jīng)擦拭试管,对试(shì)管的外壁进行(háng)洒(sǎ)精(jīng)消毒。
在将(jiāng)试管放进无菌接种(zhǒng)箱内(nèi)时,还需(xū)要将用于接种的下其一(yī)同放进接种箱的,如:托(tuō)盘、酒(jiǔ)精灯(dēng)、打火机、器皿(mǐn)、接种(zhǒng)钩、镊子等一(yī)起(qǐ)放(fàng)入接种箱内进行消毒处理(lǐ).对(duì)于接(jiē)种箱(xiāng)内的消毒处理,可以将装有高锰酸钾和(hé)甲(jiǎ)醛混合物的被子(zǐ)放入接种(zhǒng)箱内,消毒时保证接种(zhǒng)箱的密封。
(2)原(yuán)种的制作及(jí)培养
①制作原种培养基(jī):以(yǐ)质量分(fèn)数计(jì),取小麦80
%、木销10%和麦麸(fū)10%,将所述(shù)小麦煮熟后捞出(chū),与(yǔ)所述木销和麦(mài)数搅拌均匀,水分控制在60-80 %
,装入培(péi)养(yǎng)瓶中(zhōng),瓶(píng)口用棉(mián)花塞住,将所述培养瓶放在火(huǒ)菌锅里火菌后,100℃下保温6小时,取出冷却后即(jí)得原种(zhǒng)培养基;
②培育原种:将所述培养瓶和装有母(mǔ)种的(de)试管放入接种箱中密封(fēng)半小时后(hòu),再将(jiāng)试管中的毋种接入(rù)到所(suǒ)述原(yuán)种培养基的培养瓶中,保持温度20℃即可。
(3)较培(péi)中的制作及(jí)培养(yǎng)
①制作栽培种培养基:以质量分(fèn)数计,取小麦(mài)75%煮熟后捞出,放入15%木销、
5%麦麸和5%泥上搅拌均匀,含水量(liàng)60% -80%.装入聚丙烯袋中封(fēng)口(kǒu),将所述聚丙(bǐng)烯袋放在灭菌锅里灭菌.常压100℃下保存4小(xiǎo)时(shí),取出冷却至(zhì)室温:
②培育栽培种:将所述聚(jù)丙烯袋和(hé)原种培养基的培养瓶置于接种箱(xiāng)中密封半小(xiǎo)时后,再将步骤(2)培养的原种接入(rù)到所述聚丙烯袋巾,在20℃环境下(xià)培(péi)养15-20天可获(huò)得栽培种。
在上(shàng)述的步骤(zhòu)(1)之前,还需要采集(jí)新(xīn)鲜(xiān)的羊肚菌(jun1)子(zǐ)实(shí)体,将子(zǐ)实体切(qiē)成直径
2-3mm的(de)菌块(kuài),取经过高压灭菌的PDA培养纂(zuǎn),将所述菌块放在(zài)PDA培养基(jī)上,将所述PDA培养基(jī)置(zhì)于20℃的培养箱中,,周后可获(huò)得菌丝(sī)。
在本方案(àn)中,接种箱(xiāng)始终(zhōng)处于无菌(jun1)状态,在(zài)进行培养基(jī)的接种处理时,在接种(zhǒng)箱内放入一杯(bēi)装有高锰(měng)酸钾和甲(jiǎ)醉的混合液体,用于对接(jiē)种箱(xiāng)内的空气(qì)进(jìn)行杀(shā)菌(jun1)消毒处理。
与现有技术相比(bǐ).本技(jì)术实施例具有以下优点:
通(tōng)过应用本技术实施例的技术方案,在(zài)羊肚(dù)菌菌种的(de)培育过程(chéng)中,通过对现有技术中的培养(yǎng)基配方进(jìn)行(háng)改(gǎi)进,在(zài)菌种培育的各阶(jiē)段采用不同的(de)培养(yǎng)基达到最好的培育效(xiào)果,木方案提供的菌种(zhǒng)培育方法(fǎ),培育出的(de)羊肚菌菌种品质优良,同(tóng)时(shí),大大提(tí)高了(le)羊肚菌(jun1)种植(zhí)的(de)存活率。