经过我们多年生（shēng）产（chǎn）实践（jiàn）栽（zāi）培总结出来的（de）经验是选用当年表现（xiàn）优异的羊肚菌子（zǐ）实体进行组织分离以后，再繁育出来的（de）菌种进行栽培播种（zhǒng），由于转代次数少（shǎo），变异性概率低。再进行播种（zhǒng），基（jī）本可以（yǐ）保障稳定（dìng）的（de）出（chū）菇率。综上所述，掌握成（chéng）熟的羊（yáng）肚菌育种（zhǒng）技术（shù）是必要的。以下为大（dà）家详细的介绍羊肚菌菌（jun1）种分离（lí）及提纯复壮技术：
一，选种菇  正（zhèng）常情（qíng）况在（zài）清（qīng）晨还没有浇水之前采摘（zhāi）6分熟（shú）的，没有病害感染（rǎn），虫害咬食的健康羊（yáng）肚菌作为种菇，还要看菇形与其母本的外观（guān）形态（tài）相（xiàng）似度越高越（yuè）好（hǎo）。采菇以后不要（yào）带土装入塑料袋中，根据不同（tóng）品种写（xiě）好标（biāo）签。
二，种菇（gū）处理  将（jiāng）采到的种（zhǒng）菇进行测（cè）量，称重，并（bìng）做好详细记（jì）录，测试种菇高，菌柄直（zhí）径，菌帽（mào）直径（jìng），和（hé）菌帽（mào）高（gāo）度。

三，准（zhǔn）备工作  将制备好的PDA 培养（yǎng）基试管，无菌水，储水罐，酒精棉，无菌棉（mián）摄子，酒精灯，火机，种菇等（děng）物品放到无菌操作台（tái）上，将杀菌灯开（kāi）好，无菌（jun1）风机同时（shí）打（dǎ）开，20分钟后就可以（yǐ）进（jìn）行分离羊肚菌菌种的操作了。也（yě）可以（yǐ）在接（jiē）种箱中进行，把（bǎ）上述物品全（quán）部（bù）放入接种箱（xiāng）。接种箱封闭好以（yǐ）后用二氯异氰悄酸纳薰蒸30分（fèn）钟即（jí）可开始分离羊肚菌（jun1）菌种的工（gōng）作了。

四，分离菌种  1，带（dài）好手套，伸入（rù）无菌操（cāo）作台的无菌区，或（huò）接种箱内，先（xiān）用（yòng）酒精棉球对（duì）双手手套外表（biǎo）进（jìn）行彻底（dǐ）擦拭消毒，然后（hòu）用无菌水对羊肚菌（jun1）种菇进行冲洗冲洗过（guò）程的水倒（dǎo）入储（chǔ）水罐中，内外都要冲洗，冲洗时间为2-3分（fèn）钟，冲洗以后用无菌棉吸（xī）干羊肚菌表面水分。然后将攝子用酒精棉消毒处理以（yǐ）后，放在酒（jiǔ）精（jīng）灯火焰（yàn）顺风方向燃烧消毒，再（zài）将（jiāng）羊肚菌菌帽（mào）与菌柄处掰断，将菇（gū）帽（mào）部分放（fàng）到一（yī）边，只用菌柄部分，再拿起一支试管（试（shì）管和（hé）菌柄同时用左手拿（ná）好，在（zài）酒（jiǔ）精（jīng）灯火焰顺风处取下（xià）棉（mián）塞，棉塞（sāi）夹在右手中指和无名（míng）指（zhǐ）之间，注（zhù）意（yì）塞（sāi）入试管部分的棉塞向外，不要（yào）与（yǔ）手接触（chù），右手的拇指和食指拿摄子夹取菌柄与菌（jun1）帽（mào）断（duàn）开（kāi）处的3毫米见方（fāng）的一块（kuài）羊肚（dù）菌组织（zhī），接入（rù）试管斜面培养（yǎng）基前端，塞好棉塞，放在（zài）旁边，注意始（shǐ）终保持试管培养（yǎng）基平面向下，轻拿轻放（fàng）。然后再（zài）进行下一支试管的（de）操作。

五，培（péi）养  将分离（lí）好的（de）菌种（zhǒng）贴好标签：标签内容包括日期，品种名称等信息。然后（hòu）就可以放在（zài）20-23度的条件下恒（héng）温（wēn）培养（yǎng）。注意（yì）每天观察长势，杂菌感染严重的及时挑出。感染轻微的可以保留进行提纯处理。

六，提（tí）纯  在（zài）分离的过程（chéng）中，难免有杂菌感染，根据羊肚菌（jun1）菌丝生长速度快的特（tè）点，即（jí）使有羊（yáng）肚菌菌丝与杂菌共同萌发生长，经过三（sān）天培养，羊（yáng）肚菌菌（jun1）丝长（zhǎng）势会（huì）超（chāo）过杂菌一大（dà）截，遇到这种情况（kuàng）时就可以进行提（tí）纯处理：
1，准备（bèi）工（gōng）作：准备（bèi）提纯的菌种，空PDA试管培养基，酒精（jīng）灯，酒精（jīng）棉，接种钩（gōu），火（huǒ）机。消（xiāo）毒处理和上述方法一致（zhì）。
2，提纯流程  戴好（hǎo）手套，用酒精棉擦拭消毒，将接种（zhǒng）钩（gōu）擦拭消毒，然（rán）后在酒（jiǔ）精灯火焰顺风方向取下等待提纯菌种试管棉塞（sāi），用接种钩在酒（jiǔ）精（jīng）灯火焰处灼烧消毒处理以后将（jiāng）原来接入的已经感染（rǎn）杂菌的组（zǔ）织块部位的培养基一（yī）同（tóng）钩出试管，没（méi）有感染杂菌长有羊肚（dù）菌菌丝的（de）培（péi）养基保留1-2厘米即可。注意接种钩尽量不（bú）要接触到杂菌感染的部（bù）分。然后仔（zǎi）细（xì）对接种钩（gōu）进行彻底消毒处理以后就可以取（qǔ）保（bǎo）留的羊肚菌（jun1）纯（chún）菌丝接入新的PDA培养基中，大小以3毫米见方（fāng）一块为宜。然后（hòu）将（jiāng）提纯后的（de）试（shì）管贴好标签，做（zuò）好记录。再放到20-23度（dù）进行恒（héng）温培养。
七，菌种保藏（cáng）   分离，提纯（chún）好的羊（yáng）肚菌菌种以（yǐ）后需要及（jí）时（shí）进行菌种（zhǒng）保藏（cáng）处理，具体（tǐ）请参照菌种保藏方法 在适当的季节进行出菇（gū）栽培实验。